S.BIOMEDICS

중증하지허혈 치료제 FECS-Ad 동종지방유래 중간엽줄기세포 스페로이드 (Allogeneic Adipose-derived Mesenchymal Stem Cell Spheroids)

중증하지허혈이란?: 하지 혈관 막힘으로 인해 조직의 궤양 및 괴사를 유발하는 말초동맥질환

발생 원인: 하지 혈관의 협착, 폐색 또는 폐쇄로 인한 혈류의 감소로 발병된 말초동맥질환이 악화되어 발전
흡연, 고혈압, 당뇨 등 질환의 합병증으로 발생
증상: 평소에도 심한 허혈성 통증을 유발하며, 조금 더 진행되면 피부 궤양이나 조직의 괴사 등을 유발 치료 지연 시 6개월 이내 사지를 절단하는 상황이 초래

기초연구	비임상	1상	2상	3상	허가
임상1/2a상

DATA

혈관재생인자 분비

조직재생 및 혈관신생 관련 사이토카인(IL-6, IL-8) 및 성장인자(VEGF, b-FGF)는 2차원 배양법(2D) 및 타 3D 기술보다 FECS-Ad에서 우수한 생성률을 보입니다.

혈관조직 형성

육안 관찰

혈관형성 효과를 확인하기 위하여 누드마우스의 근육에 PBS(음성대조군), 2차원 중간엽줄기세포(2D MSC) 및 FECS-Ad를 주입한 후 조직의 형태를 관찰한 결과, FECS-Ad를 주입한 조직에서 다량의 붉은색 혈관이 육안으로 관찰되었습니다.

PBS

혈관조직 관찰되지 않음
2D MSC

일부 혈관조직 관찰
FECS-Ad

다량 혈관조직 관찰

면역형광염색

조직 내 혈관 형성 여부를 확인하기 위하여 혈관내피세포 마커인 CD31 및 αSMA를 이용하여 면역형광염색을 수행하였습니다. 음성대조군(PBS)에서는 혈관내피세포가 거의 관찰되지 않은 것에 비하여 FECS-Ad 투여군에서는 CD31 및 αSMA가 다량 검출되었고 이들이 관류구조(tubular structure)를 형성하고 있는 것으로 보아 혈관조직이 재생되었음을 확인하였습니다.

- 정상대조군
- FECS-Ad Day 14
- PBS Day 14
- FECS-Ad Day 28
CD31 and HNA
- 정상대조군
- FECS-Ad Day 14
- PBS Day 14
- FECS-Ad Day 28
αSMA

조직 섬유화 개선

투여부위의 근육조직으로 H&E(Hematoxylin and Eosin) 및 MT(Masson’s Trichrome) 염색을 수행한 결과, 음성대조군(PBS)에서는 조직의 섬유화가 많이 관찰되는 것에 비하여 시험물질 투여군(FECS-Ad)은 섬유화된 조직이 거의 관찰되지 않으며 정상조직(양성대조군)과 유사한 양상을 보여주었습니다.

- 정상 조직
- FECS-Ad Day 14
- PBS Day 14
- FECS-Ad Day 28
H&E
- 정상 조직
- FECS-Ad Day 14
- PBS Day 14
- FECS-Ad Day 28
MT

하지 재생 효과

하지허혈 모델동물에 PBS(음성대조군)를 투여하였을 때는 조직이 괴사하여 7일째부터 하지가 소실되었으며, 2차원 중간엽줄기세포(2D MSC) 투여 시에는 일부 혈류가 개선되었으나 말단 족부까지 회복되지는 않았습니다. FECS-Ad 투여군에서는 관찰 7일째부터 혈류가 개선되었으며 28일째에는 하지 및 말단 족부까지 완전히 재생되는 결과를 확인하였습니다.

	Day 0	Day 7	Day 14	Day 21	Day 28
PBS
2D MSC
FECS-Ad